DCS細(xì)胞|慧穎科研用|小鼠樹突樣細(xì)胞株

產(chǎn)品名稱：DCS細(xì)胞

中文名稱：小鼠樹突樣細(xì)胞株

來源：小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性：梭形,胞突呈分枝狀，常有大小粗細(xì)不等的胞突

特征特性：LⅡ瘤株在615小鼠皮下移植后，取脾臟原代培養(yǎng)，傳20代后鑒定：細(xì)胞呈多角形、梭形及不規(guī)則形，胞突呈分枝狀，常有大小粗細(xì)不等的胞突；經(jīng)鑒定證明是小鼠樹突狀肉瘤細(xì)胞；615小鼠皮下移植100%成瘤。

培養(yǎng)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%CS　

傳代方法：1:3~1:6傳代；2~3天1次。

細(xì)胞檢測(cè)：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

運(yùn)輸方式：凍存、復(fù)蘇、傳代、全血清包被

探討樹突狀細(xì)胞(DC_s)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)在食管鱗癌中的表達(dá)和臨床病理研究有著重要的意義。

慧穎細(xì)胞庫2016年二月新增“成員”有：

DCS細(xì)胞，小鼠樹突樣細(xì)胞株

LC540細(xì)胞，睪丸間充質(zhì)細(xì)胞株

LETP-A-2細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞株

NCI-H520細(xì)胞，人肺鱗癌細(xì)胞株

FRTL-5細(xì)胞，大鼠甲狀腺內(nèi)泡細(xì)胞株

GIST-882細(xì)胞，人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞株

BAF3細(xì)胞，小鼠原B細(xì)胞株

WEHI-3細(xì)胞，小鼠血液細(xì)胞株

32D細(xì)胞，小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞株

體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)。當(dāng)細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)器皿的表面時(shí)，正常的細(xì)胞停止生長(zhǎng)，但是轉(zhuǎn)化（即發(fā)生遺傳物質(zhì)突變）的對(duì)接觸抑制不敏感的細(xì)胞會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)。如果不及時(shí)傳代，這些轉(zhuǎn)化的細(xì)胞就會(huì)逐步取代正常的細(xì)胞。所以培養(yǎng)的DCS細(xì)胞|慧穎科研用|小鼠樹突樣細(xì)胞株要及時(shí)傳代。

細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)：

玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;

無菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上;

培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗(yàn):將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后置4度保存;

消化液(pH7.8)或其它加入液，應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌，分裝成支置-20度保存;

培養(yǎng)箱應(yīng)先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應(yīng)照射1小時(shí)以上，如有高溫滅菌的應(yīng)按程序來菌)。至少每月一次。

進(jìn)入操作時(shí)應(yīng)注意先清洗雙手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作時(shí)注意無菌臺(tái)內(nèi)空間層次。手及物品不要在暴露的瓶口上方來往，如果數(shù)量較多，培養(yǎng)瓶應(yīng)放在與酒精燈平行地方便于操作，瓶與瓶之間應(yīng)相隔一定的距離，開瓶(蓋)時(shí)應(yīng)先用75%酒精反復(fù)擦拭或用燈燒，打開后應(yīng)用燈先燒口，然后燒蓋。用完后同樣操作。整個(gè)操作過程盡量在無菌臺(tái)靠里面一點(diǎn)。

若DCS細(xì)胞|慧穎科研用|小鼠樹突樣細(xì)胞株狀態(tài)不好，分析原因：

1、  培養(yǎng)基的新鮮程度：一般加入血清后的*培養(yǎng)基，2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活，影響細(xì)胞培養(yǎng)。

         建議：*培養(yǎng)基一次不要配太多，200ml以下?；蚋鶕?jù)用量決定。

 2、  細(xì)胞外源微生物的污染：細(xì)胞不宜長(zhǎng)期體外培養(yǎng)，因?yàn)橥庠次⑸镂廴镜膸茁蚀蟠筇岣?。易發(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的。影響細(xì)胞狀態(tài)。

        建議：實(shí)驗(yàn)前凍存一批細(xì)胞，隔幾個(gè)月重新復(fù)蘇。即保證實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞代數(shù)*，又將外源污染的后果降到zui低。

3、  排除其他原因：如更換培養(yǎng)條件（血清、培養(yǎng)基等）；使用器皿的潔凈程度；

吳茱萸Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth.  Evodine 吳茱萸內(nèi)酯  6989-38-4   C18H19NO5   ≥98%

吳茱萸Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth.  Evodol  穆茱萸內(nèi)酯醇    22318-10-1  C26H28O9    ≥98%

決明Cassia tora Evofolin B  楝葉吳萸素 B    168254-96-4 C17H18O6    ≥96%

兩面針Zanthoxylum nitidum   Evofolin C  3-[4-[(3-甲基-2-丁烯基)氧基]苯基]-2-丙烯-1-醇   163634-05-7    C14H18O2    ≥95%

三椏苦Evodia lepta  Evoxine 尖葉云香堿，吳茱萸素    522-11-2    C18H21NO6   ≥99%

假黃皮Clausena excavata Excavatin M none    250293-31-3 C19H20O7    ≥95%

日本繡線菊Spiraea japonica  Exoticin    3,5,6,7,8,3',4',5'-八甲氧基黃酮 13364-94-8  C23H26O10   ≥97%

蓽澄茄Piper cubeba  N-Feruloyl-3-methoxytyramine    N-反式-阿魏酰低聚糖-3-甲氧基酪胺    78510-19-7    C19H21NO5   ≥95%

木曼陀羅Datura arborea  N-Feruloyloctopamine    N-阿魏酰章魚胺  66648-44-0  C18H19NO5   ≥98%

多脈瓜馥木Fissistigma balansae  N-Feruloyltyramine  N-反式阿魏酰酪胺    66648-43-9  C18H19NO4   ≥97%

黃花蒿 Artemisia annua  α-Epoxydihydroartemisinic acid ALPHA-環(huán)氧二氫青蒿酸    380487-65-0 C15H24O3    ≥98%

懷牛膝Achyranthes bidentata BI.root β-Ecdysone β-蛻皮甾酮 5289-74-7   C27H44O7    ≥98%

蒼術(shù)Atractylodes lancea (Thunb.) DC.    β-Eudesmol beta-桉葉醇 473-15-4    C15H26O ≥98%

菊科植物林澤蘭 Eupatorium lindleyanum   Eupalinilide D  林澤蘭內(nèi)酯 D    757202-14-5 C15H19ClO5  ≥98%

野馬追Eupatorii Lindleyani Herba    Eupalinolide A  野馬追內(nèi)酯 A    877822-41-8 C24H30O9    ≥98%

野馬追Eupatorii Lindleyani Herba    Eupalinolide B  野馬追內(nèi)酯 B    877822-40-7 C24H30O9    ≥98%

艾葉Folium Artemisiae Argyi Eupatilin   異澤蘭黃素  22368-21-4  C18H16O7    ≥98%

杜虹花Callicarpa pedunculata    Eupatorin   半齒澤蘭素  855-96-9    C18H16O7    ≥98%

王爺葵Tithonia diversifolia Eupatoriochromene   半齒澤蘭素色烯  19013-03-7  C13H14O3    ≥99%

京大戟Euphorbiae Pekinensis Radix   Euphol  大戟二烯醇  514-47-6    C30H50O ≥98%

續(xù)隨子Euphorbia lathyris    Euphorbia factor L1 綠玉樹因子TI2   76376-43-7  C32H40O8    ≥95%

豬屎豆Crotalaria pallida    Eurycarpin A    黃甘草異黃酮 A  166547-20-2 C20H18O5    ≥97%

毛喉蕊花Coleus forskohlii   Euscaphic acid  薔薇酸,'野鴉椿酸    53155-25-2  C30H48O5    ≥97%

對(duì)于凍存應(yīng)遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37~37.5℃，取出凍存的細(xì)胞迅速放入后將細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化。

1000g離心5min，棄上清，加入1ml新鮮*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。

在無菌臺(tái)內(nèi)取適量*培養(yǎng)基加入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，然后用無菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞，置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃，使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

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